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三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)基的幾點(diǎn)要求

更新時(shí)間:2017-07-31瀏覽:2509次
  現(xiàn)代生物技術(shù)均通過細(xì)胞作為載體來進(jìn)行,無論是基因治療、干細(xì)胞、克隆技術(shù)都在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的。三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)細(xì)胞生長需要一定的營養(yǎng)環(huán)境,用于維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基,即指所有用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存細(xì)胞用的物質(zhì),就其本意上講為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。細(xì)胞培養(yǎng)基其組成成分主要有:水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)離子及其他一些入核酸降解物、激素等。
  三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求:
  一、營養(yǎng)成分;維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個(gè)方面:
  1.氨基酸:細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。
  2.單糖:培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收能力高,半乳糖低。
  3.維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,*。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。
  4.無機(jī)離子與微量元素:細(xì)胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。
  二、促生長因子及激素。各種激素、生長因子對(duì)于維持細(xì)胞的功能、保持細(xì)胞的狀態(tài)(分化或未分化)具有十分重要的作用。
  三、滲透壓。細(xì)胞必須生活在等滲環(huán)境中,大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定耐受性。
  四、無毒、無污染。體外生長的細(xì)胞對(duì)微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有抵抗能力,因此培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到無化學(xué)物質(zhì)污染、無微生物污染、無其他對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染。
  五、pH。氣體也是細(xì)胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生能量供給細(xì)胞生長、增殖和合成各種成分。一些細(xì)胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數(shù)細(xì)胞缺氧不能生存。在開放培養(yǎng)時(shí),一般置細(xì)胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環(huán)境中培養(yǎng)。二氧化碳既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)基的pH有直接關(guān)系。
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