熒光定量PCR儀可標(biāo)記有熒光素的探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復(fù)性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律，與模板DNA互補(bǔ)配對(duì)的探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長(zhǎng)，通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)與之對(duì)應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號(hào)強(qiáng)度，求得CT值，同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，即可得出待測(cè)標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。
　　熒光定量PCR儀在臨床疾病診斷上有著重要的意義，一起來(lái)看看：
　　1.熒光定量PCR儀在結(jié)核菌檢測(cè)中的應(yīng)用及意義
　　結(jié)核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在：區(qū)分TB與其它分枝桿菌；檢測(cè)TB耐藥基因；提高TB的陽(yáng)性檢出率。
　　2.熒光定量PCR儀在HBV檢測(cè)中的應(yīng)用及意義
　　了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量；是否復(fù)制；是否傳染，傳染性有多強(qiáng)；是否有必要服藥；肝功能異常改變是否由病毒引起；判斷病人是適合用哪類(lèi)抗病毒藥物；判斷藥物治療的療效。
　　3.熒光定量PCR儀在CT檢測(cè)中的應(yīng)用
　　CT是非淋菌性尿道炎的主要病原微生物之一，有時(shí)還可引起不育等其它疾病。CT為專(zhuān)性細(xì)胞寄生性，一般培養(yǎng)不能生長(zhǎng)，只有在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖復(fù)制，實(shí)驗(yàn)室通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)觀(guān)察包涵體。但因操作復(fù)雜，技術(shù)要求高，需時(shí)間長(zhǎng)，并不適于臨床檢測(cè)。免疫學(xué)方法有直接免疫熒光法、EIA法等，但這兩種方法無(wú)論是檢測(cè)抗原還是抗體陽(yáng)性率均不足50%，用單抗會(huì)丟失位點(diǎn)、多抗有交叉反應(yīng)，在高危人群篩查中常與金黃色葡萄球菌、鏈球菌、淋球菌等發(fā)生交叉反應(yīng)使其特異性受到影響，因此，國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家一致認(rèn)為CT的基因診斷方法應(yīng)定為“金標(biāo)準(zhǔn)”。